29 | 05 | 2022
Аршба И.М., Джикидзе Э.К., Раковская И.В., Горина Л.Г., Гончарова С.А. Иммунологические показатели инфицированности обезьян «урогенитальными микоплазмами»//ЖМЭиИ.- 2007.- №5.-C.87-90

Аршба И.М., Джикидзе Э.К., Раковская И.В., Горина Л.Г., Гончарова С.А. Иммунологические показатели инфицированности обезьян «урогенитальными микоплазмами»//ЖМЭиИ.- 2007.- №5.-C.87-90

Иммунологические показатели инфицированности обезьян “урогенитальными микоплазмами”

Аршба И.М., Джикидзе Э.К., Раковская И.В., Горина Л.Г., Гончарова С.А.

В последние годы значительно возрос интерес к изучению роли микоплазм в заболеваниях человека. Ранее многие исследователи моделировали микоплазменные инфекции человека на различных лабораторных животных (крысы, морские свинки и др.) К сожалению, в большинстве случаев не удалось полностью воспроизвести клиническую картину этих инфекций [3,4]  .

В этом плане особый интерес представляют обезьяны, обнаруживающие высокую степень чувствительности к многим возбудителям инфекционных заболеваний человека, в том числе к микоплазмам [1,2]. Ранее на обезьянах (макаки резусы, макаки лапундеры) были воспроизведены заболевания урогенитального тракта:  хронический и острый уретрит, аднексит и др.. [Марантиди и соавт., 1987г.]  

Для получения достоверных результатов по моделированию урогенитальных и микоплазменных инфекций необходимо изучить обсемененность обезьян разными видами микоплазм в условиях их содержания в неволи (в вольерах и групповых клетках).

С этой целью были проведены серологические исследования проб сывороток крови как здоровых, так и обезьян с воспалительными  заболеваниями урогенитального тракта.

Материалы и методы

Исследования проводили в ГУ НИИ МП РАМН на базе Адлерского питомника обезьян и в лаборатории микоплазм и Л-форм бактерий ГУ НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи РАМН .  Были обследованы обезьяны рода макак ( 43 резус, 8  яванских) разного  возраста от 2 до 25 лет, общее количество составляет 51 особей: 41 самок и 10 самцов.

Обезьяны содержались в открытых вольерах площадью 200-1000 кв.м ( от 30 до 70 особей) или в групповых клетках по 5-7 особей.

Антигены микоплазм и уреаплазм определяли в реакции агрегатгемагглютинации (РАГА), антитела к ним в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА). Для выявления IgG -  и IgM – антител использовали модификацию иммуноферментного анализа (ИФА). Приготовление диагностических препаратов и постановка реакций разработаны в лаборатории микоплазм и Л-форм бактерий [3].

Для подготовки и постановки ПЦР использовали коммерческие наборы производства НПФ ЛИТЕХ, БИОКОМ (г.Москва), гарантирующие высокую диагностическую эффективность.

Материалом для исследования служили пробы сыворотки крови обезьян, соскобы эпителиальных клеток влагалища, уретры. Взятие материала осуществляли  универсальными одноразовыми зондами.

Результаты и обсуждение

В Таблице 1 и 2 приведены сведения  по обнаружению специфических антител классов Ig G и IgM к M.hominis и Ur.urealyticum в реакциях ИФА и РПГА, а также антигенов к данным микроорганизмам в РАГА, как здоровых , так и больных обезьян с патологией беременности и родов (всего 51 обезьян).

Таблица 1

Обнаружение в сыворотке крови обезьян антител к M.hominis

Методы

исследования

Положительные

Отрицательные

абс.

%

абс.

%

ИФА: IgG

IgM

16

(31,3±6,4)

35

68,6

21

(42±6,9)

30

58,6

РПГА

8

(15,6±5)

43

85,6

РАГА

16

(33,3±6,6)

35

68,6

Таблица 2

Обнаружение в сыворотке крови обезьян антител к Ur. urealyticum 

Методы

исследования

Положительные

Отрицательные

абс.

%

абс.

%

ИФА: IgG

IgM

32

(62,7±6,7)

19

37,2

30

(58,8±6,8)

21

41,1

РПГА

16

(31,1±6,4)

35

68,6

РАГА

22

(43,1±6,8)

29

56,8

Исходя из таблицы 1 - частота обнаружения антител класса Ig M была несколько выше, чем антитела класса Ig G (21 и 16 соответственно). При этом антитела класса Ig G и Ig M были обнаружены у 8 обезьян одновременно. Титр антител класса Ig G в ИФА колебался в пределах 1:400-1:3200 (в среднем 650±101,19)^, титр антител к Ig M колебался 1:800-1:1600 (в среднем 876,19±33,70).

Частота обнаружения  антител в РПГА составляла 15,6% при среднем титре 1:32.

Антиген к M.hominis был обнаружен у 16 обезьян в титрах 1:8-1:16 средний титр 1:8. При этом надо отметить, что у 4 из 16 обезьян антиген обнаруживается на фоне отсутствия антител, а у 6 обезьян общие антитела и антиген.

То же количество сывороток было исследовано на  наличие антител и антигена к U.urealyticum. (таблица 2). Обнаружение классов Ig G и Ig M составило 32 и 30 соответственно. Следует указать, что у 22 обследованных животных одновременно обнаруживаются антитела класса Ig G и Ig M. Титр антител класса Ig G колебался в пределах 1:200-1:3200 (в среднем 781,35±101,19)^, титр класса Ig M колебался в пределах 1:800-1:1600 (в среднем (1040±52,21).

Частота обнаружения антител в РПГА составляет 31,1% при среднем титре 1:32.

Антиген к U.urealyticum был обнаружен у 22 обезьян в титрах 1:8-1:16, общие антитела и антиген обнаружены у 13 обезьян из 22. Следует отметить, что частота обнаружения антител класса Ig G и Ig M к U.urealyticum примерно в 2 раза выше, чем M.hominis.

^  - стат. обработка по методу Стьюдента. 

Таблица 3    Показатели антител и антигена из общего количества сывороток .                                                 

Микроорганизм

И Ф А

РПГА

РАГА

Ig G

Ig M

А Т

А Г

M.hominis

31,3%

42%

15,6%

33,3%

Ur.urealyticum 

62,7%

58,8%

31,1%

43,1%

Высокая частота обнаружения антител класса Ig M, как M.hominis так и U.urealyticum (таблица 3), может свидетельствовать о свежем инфекционном процессе у обезьян, течение которого в большей части случаев не имеет выраженных клинических симптомов. Выявление антигена методом РАГА также является свидетельством развития инфекционного процесса ( 33,3% к M.hominis и  43,1 % U.urealyticum) обусловленного данными микроорганизмами, что подтверждает предположение о распространенности носительства среди обезьян в условиях неволи.

При обследовании обезьян по полу, где самок – 41, самцов – 10, частота встречаемости АТ классов G и M свидетельствует о преобладании уреаплазменной инфицированности, как у самцов, так и у самок,  70% и 58,5% соответственно. Частота антител к микоплазмам почти в 1.5 раза ниже. В данном случае существуют возрастные категории особей: половозрелые ( с 3л. и старше) и неполовозрелые (до 3х лет), а также условия содержания этих обезьян в вольерах и групповых клетках, где наблюдается близкий контакт разнополых особей.

В число обследуемых самок с патологией беременности и родов ( аборты, мертворождения, патологические роды)          входило 13 из 41.

Таблица 4

Обнаружение антител класса G и M у самок методом ИФА.

Диагноз

M. hominis

U.urealyticum

IgG

IgM

IgG

IgM

Здоровые   (n =28)

6 (21,5%)

12 (42,8%)

14 (50%)

11 (35,7%)

Больные (n=13)

7 (53,8%)

6 (46,1%)

11 (84,6%)

12 (92,3%)

Наличие антител класса G и М значительно  выше, чем у клинически здоровых самок, что обусловлено длительной персистенцией Mollicutes в сыворотке крови обезьян. ( таблица 4).  Причем  у 10 из 13 больных самок были обнаружены антитела класса G и М одновременно к U.urealyticum. При реакциях РПГА и РАГА  обнаружены общие антитела у 6 самок. Возможно это свидетельствует об остром инфекционном процессе  при патологии беременности и родов.

Многочисленные публикации свидетельствуют о том, что антитела часто обнаруживают у практически здоровых лиц и при острой микоплазменной и уреаплазменной инфекции титр антител резко возрастает,  это очевидно и при нашем исследовании.

При обследовании методом ПЦР у 9 из 51 обезьяны в урогенитальном тракте были обнаружены M.hominis и U.urealyticum ( из которых у 5 в реакции РАГА обнаружены АГ).  Причем частота обнаружения микоплазм несколько превышала уреаплазм (соответственно 8 и 2).  Хотелось отметить самку 33604 , у которой обнаружены сразу два возбудителя и очевидны показатели как антител, так и антигена. Также у данной обезьяны методом ПЦР была обнаружена C.trachomatis, т.е. наблюдается микстинфекция.  У самок 2447, 21804 и 31498 была обнаружена только C.trachomatis, хотя показатели классов антител свидетельствуют о носительстве U.urealyticum.

Среди обезьян Адлерского питомника широко распространено носительство класса MollicutesM.hominis и U.urealyticum.

Наличие антител, как M.hominis так и U.urealyticum, у взрослых половозрелых самок можно расценивать как анамнестические и свидетельствовать о перенесенной инапарантной формы микоплазменных инфекций . Высокая частота обнаружения антител класса М (42% и 58,8%) может свидетельствовать о свежем инфекционном процессе.

Выявление антигена методом РАГА также является свидетельством развития инфекционного процесса ( 33,3% к M.hominis и  43,1 % U.urealyticum) обусловленного данными микроорганизмами, что подтверждает предположение о распространенности носительства среди обезьян в условиях неволи. Многочисленные публикации свидетельствуют о том, что антитела часто обнаруживают у практически здоровых лиц и при острой микоплазменной и уреаплазменной инфекции титр антител резко возрастает,  это очевидно и при нашем исследовании.

Микоплазменная инфекция у обезьян, как и у человека характеризуется длительной персистенцией в организме агента, оказывающего иммуносупрессивное воздействие, способного активизировать и осложнять процессы. Сходство реакций обезьяны и человека на действие микоплазм делает их незаменимыми для экспериментального изучения микоплазмозов человека [1], где они могут быть рекомендованы для экспериментального изучения неясных вопросов патогенеза, а также испытания эффективности новых методов лечения, возможного применения вакцин и других иммунобиологических препаратов.

Литература

  1. Джикидзе Э.К., Крылова Р.И. //Спонтанные микоплазмозы обезьян.// БЭБиМ  2001 г.,  № 12

  1. Марантиди А.Н. //Частота выделения ахолеплазм у обезьян и их биологическая характеристика.// Автореферат диссер. канд. наук, 1982г.

  1. Прозоровский С.В., Раковская И.В. и др. //Мед. микоплазмология.// М. Медицина 1995г.

4. Fodor M. Acta Microbiol. Acad. Hungari. 1980. vol.27. p.161.